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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和ProteoSOLVE溶解劑破壞秀麗廣桿線蟲(Cae

發(fā)表時間:2009/2/27

沒有任何其他的多細胞生物像線蟲一樣在細胞和分子水平上研究的那么深入。然而,線蟲類堅硬的外表皮阻止了細胞溶解并且阻止蛋白質(zhì)學(xué)和糖蛋白質(zhì)學(xué)的研究步 伐。表皮主要由殼質(zhì)和膠原質(zhì)組成,其中膠原質(zhì)富含N端和C端半胱氨酸,而且這兩種氨基酸常以二硫鍵相連。一些酶類比如幾丁質(zhì)酶和膠原酶能夠用于弱化表皮。 但是,除非這些酶固定不變,否則這些酶會產(chǎn)生一些外生蛋白,這些蛋白會在下游分析中依然存在。另外,酶誘導(dǎo)的細胞溶解會給細胞質(zhì)、膜蛋白及其他非水溶性蛋 白的提取帶來麻煩。ProteoSOLVE溶解劑可以zui大程度的破壞線蟲表皮并增加蛋白產(chǎn)量,該溶解劑若結(jié)合壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)可獲得與其他技術(shù)相比 更多的蛋白量。

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